一种非特异性扩增天然短片段核酸的方法和试剂盒

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专利状态

一种非特异性扩增天然短片段核酸的方法和试剂盒

有效

专利申请进度

申请

2019-08-02

申请公布

2021-02-02

授权

2023-04-11

预估到期

2039-08-02

专利基础信息

申请号	CN201910712493.4	申请日	2019-08-02
申请公布号	CN112301103A	申请公布日	2021-02-02
授权公布号	CN112301103B	授权公告日	2023-04-11
分类号	C12Q1/6844ICN108265048A,2018.07.10;WO2018/151574A1,2018.08.23;US2014004508A1,2014.01.02;US2015225775A1,2015.08.13CharalamposAslanidis等.Ligation-independentcloningofPCRproducts(LIC-POR).《NucleicAcidsResearch》.1999,第18卷(第20期),6069-6074页.
分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
申请人名称	北京贝瑞和康生物技术有限公司
申请人地址	北京市昌平区科技园区生命园路4号院5号楼8层801

专利法律状态

2023-04-11

授权

状态信息

授权
2022-05-24

著录事项变更

状态信息

著录事项变更；IPC(主分类):C12Q1/6844；专利申请号:2019107124934；变更事项:申请人；变更前:北京贝瑞和康生物技术有限公司；变更后:北京贝瑞和康生物技术有限公司；变更事项:地址；变更前:102299 北京市昌平区北京市昌平区科技园区生命园路4号院5号楼8层801；变更后:102206 北京市昌平区科技园区生命园路4号院5号楼8层801
2021-02-23

实质审查的生效

状态信息

实质审查的生效；IPC(主分类):C12Q1/6844；专利申请号:2019107124934；申请日:20190802
2021-02-02

公布

状态信息

公布

摘要

本发明涉及一种非特异性扩增天然短片段核酸的方法，包括以下步骤：（1）将天然短片段核酸进行末端修复，获得末端修复的核酸；（2）将所述末端修复的核酸连接双链接头，获得连接产物，其中所述双链接头的每条链仅包含三种碱基；（3）使用具有脱氧尿嘧啶标记的PCR引物对所述连接产物进行PCR扩增，获得PCR产物，其中所述PCR引物与双链接头的一条链完全或部分互补并且仅包含三种碱基；（4）对所述PCR产物先使用具有脱氧尿嘧啶切割功能的酶进行酶切，再在脱氧核苷酸溶液存在下使用同时具有5’→3’聚合酶活性和3’→5’外切酶活性的酶进行酶切，获得天然短片段核酸的非特异性扩增产物，所述脱氧核苷酸溶液仅包含引物所缺乏碱基的互补碱基。本发明还涉及用于实施上述方法的试剂盒。

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