无参考基因组高通量简化甲基化测序文库的构建方法

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专利状态

无参考基因组高通量简化甲基化测序文库的构建方法

有效

专利申请进度

申请

2015-06-30

申请公布

2015-10-28

授权

2017-10-13

预估到期

2035-06-30

专利基础信息

申请号	CN201510377821.1	申请日	2015-06-30
申请公布号	CN105002567A	申请公布日	2015-10-28
授权公布号	CN105002567B	授权公告日	2017-10-13
分类号	C40B50/06;C40B40/06;C12Q1/68
分类	组合技术〔8〕;
申请人名称	北京百迈客生物科技有限公司
申请人地址	北京市顺义区南法信府前街12号顺捷大厦5层

专利法律状态

2017-10-13

授权

状态信息

授权
2015-11-25

实质审查的生效

状态信息

实质审查的生效；IPC(主分类):C40B50/06；申请日:20150630
2015-10-28

公布

状态信息

公布

摘要

本发明提供了一种无参考基因组高通量简化甲基化测序文库的构建方法，对样品基因组酶切和加A，获得5’末端具有磷酸化修饰和3’粘性末端A的DNA片段，将其与含有不同条形码序列的甲基化接头相连；连接产物分为两组，一组进行PCR扩增，另一组经重亚硫酸盐转化后再扩增，获得两组含有相同条形码、仅在无甲基化的胞嘧啶位点不同的扩增产物序列；两组PCR产物分别混合，选择相同的特定长度片段序列进行低循环PCR，扩增产物分别分离纯化构建高通量简化甲基化测序文库。该方法通量高、成本低、序列一致，无需参考基因组，在大量无参考基因组或参考基因组组装不全物种的DNA甲基化表观遗传学研究领域应用前景广阔。

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