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专利状态
一种人羊膜间充质干细胞原代分离及培养方法
有效
专利申请进度
申请
2014-11-28
申请公布
2015-03-25
授权
2018-06-05
预估到期
2034-11-28
专利基础信息
申请号 CN201410715077.7 申请日 2014-11-28
申请公布号 CN104450611A 申请公布日 2015-03-25
授权公布号 CN104450611B 授权公告日 2018-06-05
分类号 C12N5/0775
分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
申请人名称 广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司
申请人地址 广东省广州市国际生物岛螺旋四路一号生产区第五层502单元
专利法律状态
  • 2018-06-05
    授权
    状态信息
    授权
  • 2015-04-22
    实质审查的生效
    状态信息
    实质审查的生效IPC(主分类):C12N 5/0775申请日:20141128
  • 2015-03-25
    公布
    状态信息
    公开
摘要
本发明涉及一种人羊膜间充质干细胞原代分离及培养方法,包括以下步骤:提供人类羊膜组织、用PBS缓冲液冲洗然后剪碎、加入质量浓度为0.1~0.3%的胰蛋白酶进行消化、加入I型胶原酶及高糖DMEM基本培养基至I型胶原酶终浓度为0.1~0.2%消化、离心分离,取沉淀物、沉淀物用PBS溶液重悬,过滤后离心分离,弃去上清液,获得人羊膜间充质干细胞。与现有技术相比,本发明利用少量胰蛋白酶预处理羊膜组织,使羊膜组织疏松,进而利用组织特异性更好的I型胶原酶处理羊膜,大大缩短了消化的时间,简化了原代分离的步骤,而且能够获得较高的干细胞产量,获得的干细胞活力也相比现有技术大大提高。