本发明涉及基因工程及分子生物学领域,提供一种KRAS基因检测引物组,包括用于对KRAS基因含condon12、condon13以及condon61位点的核酸片段进行特异性扩增的引物组,其特征在于,所述引物组包括上游引物SEQ ID NO:1和下游引物SEQ ID NO:2。本发明还提供了一种基因检测试剂盒及检测方法。本发明的基因检测引物组能够对含上述待测位点的核酸片段进行特异性扩增,使得基因突变检测灵敏度高、假阳性率低;本发明采用第二代高通量基因测序技术对待测位点的基因型进行检测,使得检测周期短,通量高。