本发明公开了一种用于阿胶及其复方制剂中的阿胶真伪鉴定的组合物、试剂盒及其检测方法,所述组合物由多肽I、多肽II、多肽III以及对照品检测基质组成,通过利用该组合物检测阿胶及其复方制剂中驴皮源成分含量,从而判断阿胶真伪。所述多肽I的氨基酸序列为SEQ ID NO.1所示,多肽II的氨基酸序列为SEQ ID NO.2所示,多肽III的氨基酸序列为SEQ ID NO.3所示,对照品检测基质为鱼皮胶。通过多肽I的检测值减去多肽II的检测值,并利用多肽III的检测值来修正检测偏差,从而实现对阿胶及其复方制剂中驴皮源成分的含量检测。该方法具有含量检测准确、操作简单的优点,在阿胶产品质量监控领域将具有广泛的应用前景。