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专利状态
一种在大肠杆菌表达系统中高效表达外源蛋白的方法及其应用
有效
专利申请进度
申请
2020-02-17
申请公布
2021-08-17
授权
2023-10-17
预估到期
2040-02-17
专利基础信息
申请号 CN202010096475.0 申请日 2020-02-17
申请公布号 CN113265365A 申请公布日 2021-08-17
授权公布号 CN113265365B 授权公告日 2023-10-17
分类号 C12N1/21;C12N15/70;A61K39/12;A61K39/245;A61K39/235;A61K39/23;A61K39/39;A61K39/00;A61K45/06;A61P33/12;A61P31/14;A61P31/20;C12R1/19N
分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
申请人名称 普莱柯生物工程股份有限公司
申请人地址 河南省洛阳市高新区凌波路5号
专利法律状态
  • 2023-10-17
    授权
    状态信息
    授权
  • 2021-09-03
    实质审查的生效
    状态信息
    实质审查的生效;IPC(主分类):C12N1/21;申请日:20200217
  • 2021-08-17
    公布
    状态信息
    公布
摘要
本发明涉及一种高效表达外源蛋白的大肠杆菌构建方法及其应用,其中,所述方法包括:步骤(1)BL21(DE3)lpxM基因的敲除;步骤(2)将tig基因插入步骤(1)得到的BL21(DE3)lpxM基因缺失株;(3)重组载体pET28a‑Rcodon的构建;(4)外源蛋白基因克隆至步骤(3)得到的重组载体pET28a‑Rcodon;(5)将步骤(4)所得重组载体转化步骤(2)得到的菌株;以及步骤(6)外源蛋白的收获。本发明方法使得外源蛋白高效表达,能较大肠杆菌常规表达显著提高外源蛋白的表达量,内毒素含量大大降低,且本发明方法可应用到多种外源蛋白的高效表达,可广泛适用于真核生物来源的蛋白在内的多种兽医疫苗蛋白,具有广泛的适用范围。