本发明提供一种新城疫、禽流感、法氏囊和禽腺病毒四联疫苗,包含有抗原和疫苗佐剂,其中抗原是新城疫Lasota病毒株,保藏编号为CCTCC NO:V201517的H9亚型禽流感病毒株、由法氏囊VP2蛋白和氨基酸序列为SEQ ID NO:2的禽腺病毒Hexon蛋白和鸡α‑干扰素蛋白。本发明将新城疫Lasota病毒株、H9亚型禽流感病毒QDY株、法氏囊VP2蛋白、禽腺病毒Hexon蛋白、和鸡α‑干扰素蛋白抗原液按比例混合后,加油佐剂混合乳化制成疫苗。本发明制备的疫苗能提高免疫后的抗体水平,提高免疫后抗体的整齐度,保证了疫苗的免疫效果,此疫苗具有高效、安全性好的优点。