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专利状态
一种CHO细胞内源性冷诱导RNA-结合蛋白启动子核心序列及其应用
有效
专利申请进度
申请
2020-07-22
申请公布
2022-01-25
授权
2023-08-29
预估到期
2040-07-22
专利基础信息
申请号 CN202010708371.0 申请日 2020-07-22
申请公布号 CN113969280A 申请公布日 2022-01-25
授权公布号 CN113969280B 授权公告日 2023-08-29
分类号 C12N15/113;C12N15/10;C12N15/70
分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
申请人名称 珠海联邦制药股份有限公司
申请人地址 广东省珠海市金湾区三灶镇安基路2428号
专利法律状态
  • 2023-08-29
    授权
    状态信息
    授权
  • 2022-02-15
    实质审查的生效
    状态信息
    实质审查的生效;IPC(主分类):C12N15/113;申请日:20200722
  • 2022-01-25
    公布
    状态信息
    公布
摘要
本发明公开一种CHO细胞内源性冷诱导RNA‑结合蛋白启动子核心序列及其应用。该核心序列如SEQ ID NO.1所示。本发明通过生物信息学方法分析了CIRP基因翻译起始位点上游1500bp的DNA序列,选择置信度较高的基因片区作为假想启动子;设计引物,从CHO细胞基因组中分别克隆获得目标基因序列,再亚克隆入适合的载体中使其驱动目的基因在CHO细胞中表达,比较在37℃和32℃温度条件下不同启动子的活性,获得最优启动子序列,分析其元件组成,获得核心序列。具有该核心序列的启动子在亚生理低温条件下培养48小时后表达强度分别为CMV启动子的0.8倍和1.2倍,是37℃条件下表达强度的4.5倍和4.6倍。